動物實驗服務

實驗動物科學現在已經成為現代科學技術不可分割的一個組成部分,已形成一門獨立的綜合性基礎科學門類。這門科學的重要性在于,一方面它作為科學研究的重要手段,直接影響著許多領域研究課題成果的確立和水平的高低;另一方面,作為一門科學,它的提高和發展,又會把許多領域課題的研究引入新的境地。因此,實驗動物科學技術的重要性可概括為下面三句話:它是現代科學技術的重要組成部分,是生命科學的基礎和條件,是衡量一個國家或一個科研單位科學研究水平的重要標志。
實驗動物科學是伴隨著生物醫學科學,通過漫長的動物實驗過程形成的。但是,實驗動物科學的迅速發展,使得實驗動物的研究價值已經不僅限于生物科學方面,而且廣泛地與許多領域科學實驗研究緊緊地聯系在一起,成為保證現代科學實驗研究的一個必不可少的條件。在很多領域的科學研究中,實驗動物充當著非常重要的安全試驗,效果試驗、標準試驗的角色。
在醫學科研領域,主要涉及的動物有大鼠、小鼠、兔等。勵茨生物經過多年探索,已經實現對部分疾病模型的成功造模。下表為常做的動物模型:
| 動物疾病模型構建 | |||||
| 疾病類型 | 動物模型 | 物種 | 構建方法 | 模型驗證 | 模型成功判斷 |
| 神經系統 | 大腦中動脈堵塞及再灌注大鼠模型 (MCAO) | 大鼠 | 線栓法制備大鼠MCAO模型,該模型具有不開顱,可控制缺血時間,重復性好,造模成功率高,模型操作簡單明了,周期短等優點。 | 參照Zea Longa評價進行神經功能缺損程度評價;腦組織TTC染色觀察腦梗死面積,計算梗死率。 | 神經功能缺損程度評價+TTC染色 |
| 小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型 ( EAE) | 小鼠 | MOG35-55稀釋后與完全弗氏佐劑(含結核分枝桿菌)按1:1進行雙側腹壁或背部皮下四點注射,在誘導后第0和第2天皮下注射百日咳毒素 | 按Benson評分標準對EAE的病程進行臨床評估,觀察脊髓和腦組織炎癥細胞浸潤情況 | 神經功能評價;病理組織學:心臟灌注,取腦和脊髓組織,HE染色和Luxol fust blue髓鞘染色 | |
| 腦損傷模型 | 大、小鼠 | Feeney法:立體定位儀固定,切開頭皮,分離骨膜,重物撞擊;或側向流體沖擊 | 病理組織學:心臟灌注,取脊髓組織,HE染色、銅銀染色 | 光鏡下觀察損傷空洞或瘢痕和脊髓最大直徑比例;后肢功能喪失等。 | |
| 帕金森模型 | 大鼠 | 立體定位儀固定,切開頭皮,顱骨鉆開顱骨,注射6-OHDA; 或MPTP、LPS誘導;或者機械損傷 | 應能容易檢測其運動功能的損傷,包括運動遲緩、肌僵直和靜止性震顫等PD的主要癥狀; 模型應能顯示出路易小體的形成; | 行為學(APO誘導旋轉行為(需要旋轉計量儀來檢測)、步態調整實驗(需要步態抓取和分析系統)、爪回縮實驗、曠場試驗等);病理組織學:心臟灌注,取腦組織,HE染色和免疫組化(TH) | |
| 老年性癡呆 | 大、小鼠 | 通過注射淀粉樣蛋白(Aβ25-35)造成腦組織淀粉樣斑塊形成; 或三氧化鋁誘導;或雙轉基因小鼠 | 腦內相關指標的測定;病理檢查;行為學檢查 | 行為學(水迷宮+曠場實驗)、病理染色 | |
| 精神分裂癥 | 大、小鼠 | 化學方法 | |||
| 戊四氮誘導小鼠癲癇模型 | 小鼠 | PTZ腹腔注射,每隔10min注射一次,直至出現癲癇癥狀; 或PTZ灌流 | 注射后連續5h觀察小鼠是否有癇性發作并分級。①行為學表現,模型組小鼠注射海人酸后可出現濕狗樣抖動、頭面部肌肉陣攣、肢體陣攣及全面強直陣攣發作。生理鹽水對照組未見癲癇發作。②腦電圖表現,癲癇持續狀態小鼠表現為持續性節律性棘波、棘慢波或高波幅慢波。③病理學研究,雙側海馬均可出現神經元變性,以CA1和門區為主。 | 驚厥行為評價(Racine評分);病理組織學:心臟灌注,取腦組織,HE染色和免疫組化(C-FOS) | |
| 疼痛模型 | 大、小鼠 | 其他方法詢實驗室 | |||
| 大、小鼠、兔子 | S4-L5背部開口,分離肌肉,咬除L6橫突,暴露L5脊神經,結扎,離斷,操作復雜,定位準確 | 觀察疼痛行為反應,用vonfrey纖維絲檢測痛閾值 | 纖維絲檢測痛閾值 | ||
| 鎮靜/催眠/麻醉 | 小鼠 | 化學誘導 | |||
| 脊髓損傷模型(SCI) | 大、小鼠 | 物理擊打;Allen氏重物擊打法:手術打開椎板,物理沖擊脊髓;或脊髓壓迫損傷法(球囊壓迫法)、鉗夾型脊髓損傷 | 光鏡下觀察損傷空洞或瘢痕和脊髓最大直徑比例;后肢功能喪失等。 | 病理組織學:心臟灌注,取脊髓組織,HE染色、銅銀染色 | |
| 抑郁模型 | 大、小鼠 | 應激(震蕩、禁食、禁水、夾尾、熱刺激、冷刺激、足底電擊等),每日一種刺激,每種刺激累計2-3次 | 活動能力顯著下降、興趣喪失、快感缺乏等抑郁癥臨床表現 | 行為學(曠場實驗300/只伍洋)、或免疫組化(海馬區Trk8) | |
| 焦慮模型 | 大、小鼠 | 應激 | |||
| 消化系統 | 急性炎癥性腸病模型 (IBD) | 大鼠、小鼠 | 3%DSS自由飲水或者2.5~3%TNBS灌腸 | HE和Masson觀察評價,大體觀察, | 急性:20天;慢性2月; |
| 胃潰瘍模型 | 兔 | 乙醇灌胃的造模方法較為廣泛,也有選用乙酸局部注射法制備模型 |
胃組織進行潰瘍指數評分;取胃組織做HE染色;檢測血清中PGE2、EGF、NO、SOD等的含量。 |
生化+病理 | |
| 非酒精性脂肪肝 | 大、小鼠 | 把STZ按200µg/只給新生第二天的小鼠,腹腔注射;斷奶后,高脂飼料飼養4~8W,方法簡單,死亡率低 | 測定ALT、TG、TC,病理切片檢查 | 生化+病理 | |
| 慢性肝纖維化模型 | 大、小鼠 | 藥物誘導;國內主要有CCl4誘導和酒精誘導兩種造模方法,也有兩種方法聯合誘導大鼠模型 | 檢測肝組織中PCIII、IV-C、LN、HA、CG、PLD、MAO等指標。組織切片進行Masson染色。 | 生化+病理Masson | |
| 酒精性肝病 | 大鼠 | 飼喂法;30~60%的酒精持續灌胃4-8周 | 檢測(1)ALT、AST(2)H-E染色顯示(3)DirectRed染色(4)免疫組織化學染色(α-SMA,TNF-α) | 生化+病理HE | |
| 脂肪肝 | 大、小鼠 | 高脂高膽固醇+維生素D喂養 | 測肝功ALT、AST、ALB、ALP及血糖、血脂,常規HE,大體觀察,體重檢測等 | 生化+病理HE | |
| 急性肝衰竭 | 小鼠 | 皮下注射CCl4,白酒灌胃,方法簡單,價格便宜,但是CCl4的安全劑量范圍窄,所以劑量很難把控 | ALT、AST以及肝指數和胃勻漿中的胃蛋白等指標 | 生化 | |
| 膽結石模型 | 小鼠、兔 | 致石食物飼喂三個月以上 | 超聲檢測、測定總膽紅素、游離膽紅素和膽固醇 | B超+生化 | |
| 心血管疾病 | 動脈粥樣硬化 | 兔 | 高脂高膽固醇+維生素D喂養 | 檢測血清膽固醇、常規HE、免疫化學染色、組織樣本進行PCR或者WB檢測等 | 血清膽固醇+病理HE |
| 主動脈粥樣硬化 | Apoe缺陷黑鼠 | 高脂高膽固醇+主動脈球囊損傷 | 鼠200-300,成模率不確定 | ||
| 心肌缺血再灌注模型 | 大、小鼠 | 開胸手術 | 呼吸機 | ||
| 勁動脈、靜脈置管 | 大、小鼠 | 手術建立兩根血管隧道 | 操作可 | ||
| 骨科 | 骨關節炎 | 大鼠 | 前交叉韌帶切除骨關節炎模型 | 軟骨面形態觀察,HE染色,PCNA染色,病理評分,病理評分,疼痛評分 | 病理HE染色 |
| 大鼠 | 軟骨機械性半層(/全層)損傷模型 | 病理HE染色 | |||
| 大鼠 | 碘乙酸化學損傷骨關節炎模型 | 滑膜進行組織學觀察、取軟骨行組織學觀察及電鏡檢查 | 病理HE染色 | ||
| 類風濕關節炎 | 大、小鼠、兔子 | II型膠原誘導 | 關節組織HE染色、疼痛評分 | 病理HE染色 | |
| 股骨頭壞死模型(藥物誘導) | 小鼠、兔子 | 用糖皮質激素連續多次肌肉注射或者無水乙醇股骨內注射 | X光檢查、大體觀察、常規HE和判斷,以及相應免疫組織化學染色或凋亡檢測 | X光檢查、病理HE染色 | |
| 骨質疏松模型 | 大、小鼠 | 不同造模方法,不同收費標準 | 地塞米松、卵巢摘除 | ||
| 子宮內膜異位模型 | 大、小鼠 | 手術剝離、種植 | |||
| 急性尿毒癥模型 | 大、小鼠 | 分兩次手術,切除雙側腎臟 | 尿常規、血常規、腎功能檢查,檢測肌酐 | 生化指標 | |
| 糖尿病I型 | 大、小鼠 | 鏈脲佐菌素腹腔注射或尾靜脈注射,造模成功后大鼠出現多飲、多尿、多食癥狀,該模型具有周期短、造模成功率高,胰島B細胞損害特異性高等優點但模型大鼠死亡率高。 |
測空腹血糖值;測空腹血清胰島素; |
生化 | |
| 糖尿病II型 | 大、小鼠 | 鏈脲佐菌素聯合高脂飼料喂養共同建立大鼠模型,該模型方法穩定可靠,動物死亡率低,成功率高,可重復性好,目前國內外應用最多的方法。造模周期較長。 |
測空腹血糖值;測空腹血清胰島素; |
生化 | |
| 肥胖(高脂) | 大、小鼠 | 高脂高膽固醇+維生素D喂養 | 測肝功ALT、AST、ALB、ALP及血糖、血脂,瘦素檢測,常規HE,大體觀察,體重檢測等 | 生化+病理 | |
| 腎臟缺血再灌注 | 大小鼠、兔 | 腹部中上部開口,鈍性分離結締組織和脂肪組織,夾閉腎動脈30min,腎臟變黑變紫色,而后恢復供血,腎臟恢復正常顏色;手術簡單,死亡率低 | 外觀觀察和生化指標檢測(如SOD/MDA/CK等),ELISA檢測TNF-α/IL-6等,BUN/Scr檢測等 | 生化 | |
| 慢性腎功能衰竭(5/6腎切除法) | 大、小鼠、兔 | 第一次切除左腎2/3,第二次切除整個右腎,手術復雜,容易出血和感染,較易死亡;但模型穩定,易重復 | HE和Masson觀察評價,測定血清中BUN、血肌酐、鈣、磷等 | 生化+病理 | |
| 風濕性心肌炎 | 兔 | 小劑量多次腹腔注射阿霉素 | 病理學染色和觀察(如HE、IHC等),病理學評判,心功能檢測 | 病理HE | |
| 白內障 | 大鼠、小鼠 | 10~14日齡的大鼠一次性皮下注射20~30mol/kg亞硒酸鈉 | 晶狀體渾濁程度/晶狀體生化指標(如SOD/MDA/谷胱甘肽過氧化物酶等) | 生化 | |
| 彌漫性血管內凝血 | 大鼠 | 腹腔注射或者靜脈注射LPS | 實驗后各個時間點的外周血血小板計數(PLT)、ALT、Cr、PT、APTT、FIB、D-二聚體,并進行病理組織切片觀察 | 生化+病理 | |
| 腫瘤 | 胃癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | 肉眼觀察結合HE觀察和判斷,以及相應免疫組織化學染色 | |
| 肺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 肝癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 大腸癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 乳腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 膠質瘤 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 胰腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 食管癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 前列腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 甲狀腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 鼻咽癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 頭頸鱗癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 口腔癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 髓母細胞瘤 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
| 骨肉瘤 | ICR小鼠、KM小鼠 | 皮下 | |||
| 黑色素瘤 | C57BL/6小鼠 | 皮下 | |||
| 小鼠艾氏腹水瘤 | ICR小鼠、KM小鼠 | 腹腔 | |||
| 大鼠腹水瘤W256 | Wistar 大鼠 | 腹腔 | |||
| 白血病 | 大鼠、小鼠 | 血液 | |||
| 其它 | 根據文獻方法設計可行方案,進行個性化動物造模和處理 | ||||
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